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Acclimatation de nouvelles espèces d'huîtres creuse du genre Crassostrea: hybridation et conservatoire de souches - Contrat de Plan Etat Région Poitou-Charentes 1994-1998 - Synthèse finale ArchiMer
Boudry, Pierre; Heurtebise, Serge; Huvet, Arnaud; Chollet, Bruno; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal; Gerard, Andre.
Actions menées de 1994 à 1998 au sein du conservatoire de souches : 1. Résultats des importations, acclimatation et hybridation. a) Rappel des conditions d'introduction de nouvelles souches. L'importation de toute espèce est conditionnée par les résultats d'une enquête préliminaire dont l'objet est de rechercher les exigences écologiques de l'espèce et la situation épidémiologique dans son milieu d'origine. Le travail du LGP et de ses partenaires a été partagé en différentes actions: 1. Recherche de contacts dans divers pays étrangers, en vue de l'importation d'huîtres présentant des caractéristiques intéressantes. 2. Importation : L'importation se fait selon les normes du CIEM (Conseil International pour l'Exploration de la Mer) : contrôles pathologiques...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Acclimatation; Hybridation; Marqueurs moléculaire; Marqueurs populations; Crassostrea.
Ano: 1998 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15520/12907.pdf
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Acclimatation de nouvelles espèces d'huîtres creuses du genre Crassostrea: hybridation et conservatoire de souches. Amélioration de la qualité chez l'huître creuse Crassostrea gigas par sélection de souches performantes - Rapport année 1996 ArchiMer
Boudry, Pierre; Naciri, Yamama; Collet, Bertrand; Cornette, Florence; Heurtebise, Serge; Ledu, Christophe; Chollet, Bruno; Phelipot, Pascal; Gerard, Andre.
Les objectifs pour l'année 1996 étaient les suivants: Poursuivre les premières reproductions des espèces pour lesquelles nous disposons de géniteurs GO. L'objectif est toujours de limiter le stockage d'animaux importés en produisant une descendance simultanément à des témoins C. gigas qui serviront de comparaison. Tenter des hybridations inter-spécifiques des différents taxons présents au sein du conservatoire en fonction des connaissances disponibles dans la littérature sur ce sujet (voir pour revue Gaffney et Allen, 1993). • Importer de nouvelles souches ou espèces. Élargir la gamme des espèces présentes au sein du conservatoire de souches (les capacités d'accueil de la salle de quarantaine étant Limitée).
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Acclimatation; Hybridation; Crassostrea; Sélection génétique; Saccostrea commercialis.
Ano: 1996 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15516/12903.pdf
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Acclimatation de nouvelles espèces d'huîtres creuses du genre Crassostrea: hybridation et conservatoire de souches. Amélioration de la qualité chez l'huîtres creuses Crassostrea gigas par sélection de souches performantes - Contrat de Plan Etat Région Poitou-Charentes 1994-1998 - Convention 97 RPC-R-54 "Génétique" - Rapport année 1997 ArchiMer
Boudry, Pierre; Lapegue, Sylvie; Goyard, Emmanuel; Heurtebise, Serge; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal; Gerard, Andre.
Les objectifs pour l'année 1997 étaient les suivants : • Poursuivre les premières reproductions des espèces pour lesquelles nous disposons de géniteurs GO. L'objectif est toujours de limiter le stockage d'animaux importés en produisant une descendance simultanément à des témoins C. gigas qui serviront de comparaison. • Tenter des hybridations inter-spécifiques des différents taxons présents au sein du conservatoire en fonction des connaissances disponibles dans la littérature sur ce sujet (voir pour revue Gaffney et Allen, 1993). • Importer de nouvelles souches ou espèces. Élargir la gamme des espèces présentes au sein du conservatoire de souches (les capacités d'accueil de la salle de quarantaine étant limitée).
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Génétique des Populations; Acclimatation; Hybridation; Marqueurs génétiques; Sélection génétique; Crassostrea gigas.
Ano: 1997 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15519/12906.pdf
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Acclimatation de nouvelles espèces d'huîtres creuses du genre Crassostrea: hybridation et conservatoire de souches. Contrat Région Poitou-Charentes 1994-1998 - 1ère partie : rapport année 1994 ArchiMer
Boudry, Pierre; Naciri, Yamama; Launey, Sophie; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal; Heurtebise, Serge; Gerard, Andre.
Le laboratoire IFREMER "Génétique Aquaculture et Pathologie" (GAP) (La Tremblade et Bouin) a entrepris des actions de recherche sur ces différents points. L'Unité de Recherche en Génétique, en collaboration avec tous Ies membres du Réseau Génétique Mollusques (REGEMO) a axé une partie de ses travaux sur l'acclimatation et l'hybridation de différentes espèces du genre Crassostrea. Ces recherches ont débuté avec le soutien du Conseil Général de Charente-Maritime depuis 1992 sur des essais d'acclimatation de C. virginica, l'huître creuse américaine. En prolongement de cette étude, l'URGE a proposé à la région Poitou Charentes un programme de recherche plus vaste sur l'ensemble des espèces d'huîtres creuses. Le contrat de plan Etat-Région a été signé en...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Acclimatation; Hybridation; Crassostrea; Saccostrea; Génétique population.
Ano: 1994 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15517/12904.pdf
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Acclimatation de nouvelles espèces d'huîtres creuses du genre Crassostrea : hybridation et conservatoire de souches. Contrat Région Poitou-Charentes 1999 - Convention 99 RPC-A-203 "Génétique" ArchiMer
Boudry, Pierre; Heurtebise, Serge; Lapegue, Sylvie; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal; Gerard, Andre.
Dans le cadre du plan Etat-Région 1994-1998, un programme de conservatoire de souches a été initié au Laboratoire IFREMER de La Tremblade. Ce conservatoire a pour objectif d'acclimater différentes espèces ou souches d'huîtres creuses (genres Crassostrea et Saccostrea) afin d'acquérir des connaissances sur ces espèces et d'évaluer l'intérêt qu'elles pourraient présenter pour l'ostréiculture locale. L'importation d'espèces étrangères sur les côtes françaises est désormais strictement réglementée: la dissémination d'une nouvelle espèce peut se révéler néfaste d'un point de vue écologique et nuire aux productions existantes. De plus, ces huîtres peuvent être porteuses de pathogènes qui, s'il venaient à se répandre dans le milieu, pourraient toucher les stocks...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Acclimatation; Croisement; Crassostrea gigas; Crassostrea ariakensis; Crassostrea sikamea; Hybridation.
Ano: 1999 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15514/12901.pdf
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Acclimatation de nouvelles espèces d'huîtres creuses du genre Crassostrea: hybridations et conservatoire de souches. Contrat de Plan Etat Région Poitou- Charentes 1994-1998 - Convention 95/RPC-R-57 "Génétique" - Rapport année 1995 ArchiMer
Boudry, Pierre; Naciri, Yamama; Heurtebise, Serge; Delsert, Claude; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal; Chollet, Bruno; Cochennec, Nathalie; Gerard, Andre.
Le laboratoire IFREMER "Génétique Aquaculture et Pathologie" (GAP) (La Tremblade et Bouin) a entrepris des actions de recherche sur ces différents points. L'Unité de Recherche en Génétique, en collaboration avec tous les membres du Réseau Génétique Mollusques (REGEMO), a axé une partie de ses travaux sur l'acclimatation et l'hybridation de différentes espèces du genre Crassostrea. Ces recherches ont débuté avec le soutien du Conseil Général de Charente-Maritime depuis 1992 sur des essais d'acclimatation de C. virginica, l'huître creuse américaine. En prolongement de cette étude, l'URGE a proposé à la région Poitou-Charentes un programme de recherche plus vaste sur l'ensemble des espèces d'huîtres creuses.
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Acclimatation; Hybridation; Crassostrea virgnica.
Ano: 1995 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15515/12902.pdf
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Amélioration de la qualité chez l'huître creuse Crassostrea gigas par sélection de souches performantes - Contrat de Plan Etat Région Poitou-Charentes 1994-1998 - Rapport année 1995 ArchiMer
Boudry, Pierre; Naciri, Yamama; Heral, Maurice; Collet, Bertrand; Bougrier, Serge; Geffard, Olivier; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal; Heurtebise, Serge; Gerard, Andre.
Le programme de recherche présenté ci-dessous est le fruit d'une réflexion conjointe entre généticiens et physiologistes afin de mettre sur pied un ensemble d'expériences permettant d'étudier les bases génétiques de la variabilité des caractères impliqués dans la croissance chez l'huître creuse, Crassostrea gigas.
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Sélection génétique; Génétique des populations; Croissance; Crassostrea gigas.
Ano: 1995 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00044/15518/12905.pdf
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Analysis of shell colour determinism in the Manila clam Ruditapes philippinarum ArchiMer
Peignon, Jean-marie; Gerard, Andre; Naciri, Yamama; Ledu, Christophe; Phelipot, Pascal.
The Manila clam presents a large polymorphism for shell colours and patterns. No experiment has been conducted to study the determinism of such a polymorphism which has been well known for a long time. The aim of this study was firstly to determine the genetic variation for shell colour and secondly to produce some homozygous lines for the shell colouring. These lines could then be used as controls for laboratory experiments. The colouring is defined by three characters: asymmetry, ornamentation and hue. Clams with asymmetrical colouring are not fully pigmented, except for a posterior band on the left valve. Clams with symmetrical colouring are fully pigmented on the two valves. Four cross series were conducted between the different characters: Asymmetry...
Tipo: Text Palavras-chave: Mollusque; Bivalve; Palourde; Ruditapes philippinarum; Génétique; Hérédité mendélienne; Coloration; Asymétrie; Mollusc; Bivalve; Manila clam; Ruditapes philippinarum; Genetics; Mendelian inheritance; Colouration; Asymmetry.
Ano: 1995 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/1995/publication-3204.pdf
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Application des techniques moléculaires de PCR-RFLP et de PCR-RFLP-SSCP dans l'étude de la différenciation génétique de deux huîtres creuses : Crassostrea gigas et Crassostrea angula ArchiMer
Dufourg, Cecile.
Les 2 taxons d'huîtres creuses C. angulata et C. gigas n'étant pas différenciables sur des critères morphologiques, écologiques ou physiologiques, l'étude de leur passé évolutif fait appel à l'utilisation de marqueurs génétiques. L'étude du polymprohisme des séquences mitochondriales codant pour la sous-unité I de la cytochrome oxydase par la technique de PCR-RFLP a été réalisée sur 197 individus appartenant à 5 populations d'origine géographique différente, de type Crassostrea angulata ou Crassostrea gigas. Elle a permis la construction d'un arbre représentant les relations phylogénétiques entre ces populations. Cet arbre a été comparé à celui établi à partir de l'analyse de 3 marqueurs microsatellites. Les résultats de ces 2 analyses sont similaires et...
Tipo: Text Palavras-chave: Huître creuse; Crassostrea angulata; Crassostrea gigas; Génétique; Polymorphisme; ADN; SSCP; Biologie moléculaire.
Ano: 1998 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00033/14415/11709.pdf
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Apport d'un programme de génétique à une filière de production aquacole : l'exemple de l'ostréiculture ArchiMer
Lapegue, Sylvie; Bedier, Edouard; Goyard, Emmanuel; Degremont, Lionel; Baud, Jean-pierre; Gerard, Andre; Goulletquer, Philippe; Boudry, Pierre.
Two oyster species are currently present along the French coasts : the indigenous European flat oyster (Ostrea edulis), and the Pacific cupped oyster (Crassostrea gigas), that has been introduced from Japan since the beginning of the 70ies. The flat oyster successively suffered from two protozoan diseases during the 60ies and its production decreased from 20 000 tons/year by that time to 1 500 tons/year nowadays. Consequently, the oyster production is principally (99%) based upon the Pacific oyster species with approximately 150 000 tons/year among which 90% are grown from the natural spat. However, the hatchery production of this species is developing and was estimated to 400 to 800 millions spat in 2002. Moreover, strengthened relationships between...
Tipo: Text Palavras-chave: Growth; Selection; Genetic breeding; Genetic; Ostrea edulis; Crassostrea gigas; Oysters; Croissance; Sélection; Amélioration génétique; Génétique; Ostrea edulis; Crassostrea gigas; Huîtres.
Ano: 2004 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/2003/acte-3491.pdf
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Approche comparative de la variabilité et de la structuration génétique chez deux espèces d'huîtres cultivées (Crassostrea gigas et Ostrea edulis) présentant des stratégies reproductives et des histoires contrastées ArchiMer
Boudry, Pierre; Launey, Sophie; Huvet, Arnaud.
The two common oyster species cultivated in Europe are the flat oyster Ostrea edulis and the cupped oyster Crassostrea gigas. These species have two really different reproduction strategies (oviparity versus larviparity) and histories (natural distribution versus introductions linked to oyster culture). We used microsatellite markers to compare the observed variabilities Europe wide. O. edulis presents a lower rate of alleles per locus than C. gigas. The observed structuration levels (global Fst and by pairs values) are similar for both species, but the spatial organisation of the diversity is different. In O. edulis, appears a differentiation based on the distance (concordance of the results with those obtained with the allozymes) whereas in C. gigas,...
Tipo: Text Palavras-chave: Différenciation génétique; Variabilité; Génétique; Crassostrea gigas; Ostrea edulis; Huîtres.
Ano: 1998 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/1998/acte-3455.pdf
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Bases génétiques et plasticité de la croissance et de la survie chez l'huître creuse, Crassostrea gigas ArchiMer
Ernande, Bruno; Boudry, Pierre; Heurtebise, Serge; Haure, Joel; Martin, Jean-louis.
Growth and survival are the two most interesting characters for oyster farming as they determine the biomass produced in the farms (growth x survival). Thus, a selection program aiming at improving these two characters could be of a great help. However, the oyster, as a sessile organism, is influenced by environmental variability (spatial and temporal) either natural or caused by the used oyster culture methods. Submitted to this variability, oysters must have evolved so as to adapt (short term) to this environmental variability.
Tipo: Text Palavras-chave: Crassostrea gigas; Huîtres; Croissance; Plasticité; Génétique.
Ano: 2001 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/2001/acte-3279.pdf
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Bases génétiques et variabilité des caractères physiologiques impliqués dans la croissance de Crassostrea gigas ArchiMer
Baud, Jean-pierre; Palvadeau, Hubert; Nourry, Max; Haure, Joel; Penisson, Christian; Boudry, Pierre.
La production française d' huître creuse Crassostrea gigas représente, avec 144000 tonnes de production, la 4ème' place au ni veau mondial après la Chine (2 285 000 t), le Japon (225 000t.) et la Corée (1 85 000t.). Ce bivalve filtreur possède un potentiel d'adaptation élevé puisqu'on le trouve sous des latitudes très diverses. Malgré son importance économique mondiale (2 900 000 tonnes de production en 1996), à ce jour, très peu de programmes de sélection ont été mis en oeuvre sur cette espèce, qui n'est pas considérée comme domestiquées au sens génétique du terme. Toutefois, avant de lancer des programmes - nécessairement de grande ampleur - pour la sélection de souches d' huîtres creuses Crassostrea gigas, il est utile de répondre au préalable à...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Variabilité génétique; Croissance; Huîtres creuses; Crassostrea gigas.
Ano: 1998 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00048/15881/13303.pdf
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CAMP – Connectivité des Aires Marines Protégées - Période Mars 2009 – Février 2010. Rapport intermédiaire ArchiMer
Muths, Delphine; Bourjea, Jerome.
The main aim of the CAMP project (2009-2011) is to estimate the efficient connectivity between the Marine Protected Areas (MPA) of the South-West Indian Ocean (SWIO). For that purpose, we use a population genetics approach on 3 reef fishes: Epinephelus merra, Lutjanus kasmira et Myripristis berndti. The overall goal of the project is to provide new elements to MPA managers that will contribute to design the best network of MPAs in the SWIO. In the first year of the project, most of the time was spent to sample fishes. Based on collaborations with 5 international and national partners, we succeed to sample more than 1100 fishes within 12 sites of the SWIO. More than 850 of the 1100 fishes were already sequenced. The development of third microsatellite...
Tipo: Text Palavras-chave: Aires marines protégées; Génétique; Connectivité; Poissons de récif; Échantillonnage; Sud Ouest Océan Indien; Connectivité.
Ano: 2010 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00100/21086/18710.pdf
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CAPRETAR : Etude comparative des caractéristiques cytogénétiques et des performances de survie de naissains sauvages issus du CAPtage PREcoce ou TARdif ArchiMer
Benabdelmouna, Abdellah; Hemissi, Issam; Bodin, Stephane; Robert, Stephane; Ledu, Christophe; Laporte, Philippe.
L'action de recherche CAPRETAR (CAptage PREcoce ou TARdif: 2009-2010) a été réalisée dans le cadre du Contrat de Plan Etat Région - Poitou Charentes (CPER-PC 2007- 2013) développement durable des Pertuis Charentais. Cette action, s 'inscrit dans le cadre d 'un lien direct qui existerait entre la nature précoce/tardive d 'un captage naturel et la qualité des naissains de l'huître creuse C. gigas qui en sont issus (qualité génétique : « R » résistante ou « S » sensible et qualité génomique : taux des aneuploïdies et des dommages à l'ADN). L'objectif de cette action vise à estimer durant l 'année (2010) les performances relatives de survie de naissains issus d 'un captage précoce ou tardif réalisé l'année précédente (2009). Les résultats escomptés visent à...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Cytogénétique; Captage; Reproduction; Huîtres creuses; Crassostrea gigas.
Ano: 2011 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00062/17283/14794.pdf
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Caractérisation sur estran et en laboratoire des 3 séries produites en troisième génération : G3SD - G3C1 - G3C2 ArchiMer
Degremont, Lionel; Fortin, Adeline; Boudry, Pierre.
Dans le cadre du programme MOREST, une première génération d'huître creuse Crassostrea gigas (G1) a été réalisée en 2001 à partir d'un plan de croisement hiérarchisé par les mâles. La caractérisation sur estran de 44 familles de plein-frères réparties en 17 familles de demi-frères a permis d'estimer l'héritabilité de la survie des naissains en période estivale. La valeur obtenue (h2 = 0,81 ± 0,29) indique que la majorité de la variance phénotypique est d'origine génétique. A partir de familles G1 sélectionnées pour les performances de survies, une sélection divergente visant à améliorer ou diminuer la survie du naissain en période estivale a été réalisée en 2002 et constitue la seconde génération (G2). La sélection divergente comprend deux séries de...
Tipo: Text Palavras-chave: Huître creuse; Crassostrea gigas; Génétique; Sélection; Estran.
Ano: 2003 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00035/14668/11970.pdf
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CARTAMO : CARTographie des Anomalies génomiques dans les gisements naturels d'huîtres creuses du bassin de Marennes Oléron ArchiMer
Benabdelmouna, Abdellah; Hemissi, Issam.
Depuis son existence, le réseau biovigilance détecte des naissains sauvages issus du captage naturel atteints d'anomalies génomiques dont le taux varie en fonction des années et des sites de captage. Dans d'autres suivis, nous avons montré que ces anomalies génomiques affectant les naissains de C. gigas étaient négativement corrélées avec le niveau de survie des naissains. Dans le contexte des mortalités qui impactent lourdement depuis 2008 les naissains de C. gigas, et compte tenu du fait que les deux principaux bassins naisseurs français, étudiés dans le cadre du réseau Biovigilance, sont à la base de la fourniture de pratiquement les trois quarts des naissains annuellement utilisés, l'occurrence de ces anomalies génomiques mises en évidence dans le...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Anomalies génomiques; Huître creuse; Crassostrea gigas.
Ano: 2011 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00062/17281/14793.pdf
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Comparaison de la croissance et de la mortalité de différentes familles et lignées d'huître plate Ostrea edulis en système intensif ArchiMer
Baud, Jean-pierre; Le Bayon, Nicolas; Haure, Joel; Nourry, Max; Palvadeau, Hubert; Penisson, Christian; Naciri-graven, Yamama; Goyard, Emmanuel; Barre, Marc.
As of 1985, Ifremer set up a selection programme for resistance to the protozoan Bonamia ostreae in European flat oysters (Ostrea edulis). Two selection lines, L85 and L89, from the third and second generation, respectively, were produced with 17 and 21 different families. The experimental design also included a mixed line (L85 x L89) of seven families and a control line of five families from Quiberon broodstock maintained without selection pressure.
Tipo: Text Palavras-chave: Croissance; Génétique; Huîtres plates; Ostrea edulis.
Ano: 1997 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/1997/acte-3245.pdf
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Compte rendu de la réunion des 14 et 15 Avril 1993 - La Tremblade - Réseau Génétique Mollusques (REGEMO) ArchiMer
Gerard, Andre; Naciri, Yamama; Coatanea, Denis; Martin, Anne-genevieve; Barret, Jean; Claude, Serge; Heurtebise, Serge; Devauchelle, Nicole; Joly, Jean-pierre; Goulletquer, Philippe; Baud, Jean-pierre; Nourry, Max; Bougrier, Serge; Renault, Tristan; Cochennec, Nathalie; Chollet, Bruno; Le Deuff, Rose-marie; Peignon, Jean-marie.
La discussion générale organisée à la fin de la deuxième journée a fait ressortir les points suivants: 1- Les participants se sont déclarés satisfaits de la tenue de la réunion, tant dans son déroulement, que dans les échanges d'informations auxquels elle a donné lieu. La quantité et la qualité des résultats présentés a permis de mettre en évidence la puissance d'analyse que représente le travail en réseau. 2-L'importance de la valorisation des résultats a été soulignée à plusieurs reprises. La diffusion de l'information devrait se faire dans un premier temps par la voie de rapport internes à la DRV, puis par la voie d'articles publiés dans des revues scientifiques. Sur le programme "C. gigas triploïdes", une première diffusion des résultats obtenus en...
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Sélection génétique; Huître plate; Ostrea edulis; Génétique population; Croissance.
Ano: 1993 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00049/15981/13423.pdf
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Compte rendu de la réunion REGEMO sur l'amélioration génétique de l'huître plate du 11 mars 1998 à Nantes : Bilan actualisé du programme de sélection ArchiMer
Goyard, Emmanuel; Lapegue, Sylvie; Cochennec, Nathalie; Baud, Jean-pierre; Langlade, Aime; Joly, Jean-pierre; Buestel, Dominique; Oheix, Jocelyne; Haure, Joel.
Le programme de sélection de l'huître plate a été initié en 1985 par des pathologistes de la Tremblade. La sélection ne portait que sur le seul critère de tolérance des huîtres plates au parasite Bonamia ostreae et correspondait plus à un outil pour étudier divers aspects de la parasitose qu'un un programme d'amélioration génétique visant la relance de la culture de l'huître plate. Dans le cadre du réseau REGEMO, ce programme a ensuite été repris par les généticiens de l'Ifremer : 1) rappel historique et définition d'un vocabulaire commun à l'ensemble des membres du réseau REGEMO. 2) Inventaire et bilan des opération menées ou en cours ( sur la dernière génération de sélection produite ne 1995, sur le matériel issu de cette génération et produit en 1997....
Tipo: Text Palavras-chave: Génétique; Sélection génétique; Huître plate; Ostrea edulis; Génétique population; Croissance.
Ano: 1998 URL: http://archimer.ifremer.fr/doc/00049/15977/13419.pdf
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